サンプルの均質化の最適化

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Jun 28, 2023

サンプルの均質化の最適化

多くの分野の研究者は、さらなる分析のためにサンプルから目的の分子を抽出する必要があります。 分離手順の重要な初期ステップは、組織の均質化または細胞の破壊です。

多くの分野の研究者は、さらなる分析のためにサンプルから目的の分子を抽出する必要があります。 分離手順の重要な初期ステップは、組織の均質化または細胞の破壊です。このプロセスでは、細胞が溶解されて、核酸、タンパク質、代謝産物などの細胞内分析物が放出されます。 これらの分子は、PCR、NGS、ウェスタンブロットなどのさまざまな技術を使用して分析できます。 これらの分析方法はすべて、効率的で再現性のあるサンプル前処理に左右されるため、このステップの最適化が最優先事項となります。

最も伝統的な均質化技術には、乳鉢と乳棒を使用して組織サンプルを機械的に粉砕することが含まれます。 ただし、この手順は時間と手間がかかり、サンプルの物理化学的特性によっては最適ではない場合があります。1 化学的溶解や超音波処理などの非機械的方法でもサンプルを均質化できます。 ただし、超音波処理や化学的溶解で使用される界面活性剤によって発生する熱は、RNA などの壊れやすい分子に強い影響を与える可能性があります。1、2

最近開発された機械的方法は、溶解に必要な労力と時間を削減し、均質化効率を高めます。 たとえば、3D ビーズビート技術では、急速に加速されたビーズの動きを使用して組織サンプルを粉砕します。1 溶解チューブ内のビーズは、振動する多方向の動きによって撹拌されます。 さらに、幅広い種類の溶解キットが利用可能であり、あらゆる種類の生物学的サンプルを均質化する機会を提供します。 これらのキットには、0.3 ~ 15 mL の容量のチューブと、直径が異なるセラミック、ガラス、またはステンレス鋼で構成されるビーズが含まれています。

選択した溶解方法に関連する課題に加えて、サンプルの特性も分析物の抽出を妨げる可能性があります。 一部のサンプルでは、​​精子細胞からの DNA など、分析対象物が少量しか得られません。 その結果、研究者はより大量のサンプルを処理する必要があり、均質化に時間がかかり、機器の最大容量制限を超える可能性があります。 さらに、種子、皮膚、骨、腫瘍由来組織などの一部のサンプルは、その硬さ、弾力性、石灰化、または繊維質の性質により均質化することが困難です1,3-5。問題をさらに悪化させるのは、均質化が困難なサンプルです。溶解するとさらに多くの熱が発生し、一部の熱感受性分析物の分解または変性を引き起こします。

Precellys® Evolution Touch は、Bertin Technologies の多用途ホモジナイザーです。 組織均質化のゴールドスタンダードであるビーズビート技術を使用し、歯や髪の毛などの最も困難なサンプルでも数分以内に粉砕します。 さまざまなサイズ、重量、体積のサンプルを処理できます。 さらに、最大 24 個のサンプルを同時に均質化できます。 装置の対称性により、すべてのチューブが同じ動きに従うことができるため、各サンプルの均一な均質化効率が保証されます。 Precellys® Evolution Touch には、ユーザーが手袋を着用していても反応するタッチスクリーンが装備されています。 さらに、研究者は、さまざまな特性や量のサンプルを均質化するように設計された 30 種類の異なる溶解キットから選択できます。 最大 10,000 rpm の速度により、サンプルを通じて発生する熱が最小限に抑えられるため、熱に敏感な分析物の安全性が確保されます。 さらに、この機器は Cryolys Evolution 冷却ユニットと互換性があり、均質化前および均質化中にサンプル温度を 0 ~ 10 °C に維持できます。

Precellys® Evolution Touch は、受け入れられるさまざまなチューブ サイズ、多数の溶解キット オプション、および複数のサンプルを同時に処理する能力に基づいて、多くの研究分野に適した多用途で効率的なホモジナイザーです。

参考文献

既存の均質化方法の課題問題のあるサンプルの特性Bertin Technologies難しいサンプルの均質化に対するソリューション